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熒光定量PCR儀校準

產品簡介

熒光定量PCR儀校準主要應用于基礎科學研究、疾病研究、臨床醫(yī)學診斷、出入境檢驗檢疫、環(huán)境監(jiān)測、藥物研發(fā)等領域。

更新時間:2025-01-03
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熒光定量PCR儀校準

 

從PCR儀名稱、原理、計量特性、計量校準條件、PCR檢測儀溫度校準、計量校準結果、計量周期七個方面做闡述。


一、名稱

  PCR儀(Polymerase Chain Reaction analyzer)是一種DNA聚合酶在溫度場條件下使特定基因片段發(fā)生快速擴增的儀器。主要應用于基礎科學研究、疾病研究、臨床醫(yī)學診斷、出入境檢驗檢疫、環(huán)境監(jiān)測、藥物研發(fā)等領域。

image.png

二、基本原理

  PCR儀主要由控制系統、電源系統、溫控系統、檢測系統和電源部件組成。其基本原理為:加了使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合適pH緩沖存在條件下延伸引物,重復“高溫多變性(90-95)℃-適溫延伸(70-75)℃"過程,使得測樣本中的核酸呈指數級擴增,PCR儀工作的關鍵是溫度控制。

三、計量特性

項目
定型PCR儀
定量PCR儀
 
溫度示值誤差
+
+  
溫度均勻度
+
+  
平均升溫速率
+
+
 
平均降溫速率
+
+
 
樣本示值誤差
-
+
 
樣本線性
-
+
 
注:+為校準項目;-為非校準項目
 

四、熒光定量PCR儀校準計量校準條件

儀器使用允許的環(huán)境條件,測溫過程中應測量和記錄環(huán)境的溫度、相對濕度。

1、環(huán)境條件:溫度(15-30)℃;濕度(10%-75%)RH

2、校準設備:PCR溫度校驗儀 JDPC-96;內置15個溫度監(jiān)控探頭,探頭材質為紫銅作為溫度傳導載體;溫度傳感器、溫度反應迅速靈敏,測溫精度小于0.1℃(中國計量規(guī)程精度為0.15℃)。

image.png

            測溫探頭分布點如圖

image.png

 

五、熒光定量PCR儀校準

1、測溫點

項目
溫度點
技術指標
備注
溫度偏差
30℃ ±0.5℃

1、所列出的技術指標為PCR儀恒溫計時開始10s內到計時結束之間,某一規(guī)定的時刻點技術指標。

2、校準溫度點可以根據客戶實際使用的程序來確定,并不一定與給出的溫度點一致。

3、超調溫度包含最大超調溫度與平均超調溫度。

50℃ ±0.5℃
60℃ ±0.5℃
70℃ ±0.5℃
90℃ ±0.6℃
95℃ ±0.8℃
熱蓋溫度偏差
105℃ ±0.3℃
溫度均勻度
30℃ ≤1.0℃
50℃ ≤1.0℃
60℃ ≤1.0℃
70℃ ≤1.0℃
90℃ ≤1.5℃
95℃ ≤1.5℃
超調溫度
50℃ ≤5.0℃
95℃ ≤6.0℃
升溫速率
30℃~95℃ ≥1.5℃/s
降溫速率
95℃~30℃ ≥1.5℃/s

2、測溫前,PCR儀開機預熱30MIN,設定至需測試的溫度;嵌入15探頭PCR測溫裝置,其測溫流程如圖:

image.png

六、校準結果表達

經校準的PCR儀出具該有CNAS章的校準證書,校準結果反映在證書上,包括以下信息:校準證書、PCR儀出廠編號及品牌、校準地址、證書的標識編碼、客戶名稱及地址、校準日期、校準使用的主要器具、環(huán)境條件、結果。

具體內容如下圖:

image.png

image.png

七、校準周期:12個月

公司背景介紹:

華譜&澤恒是專注于為生物制藥行業(yè)提供實驗室儀器計量校準、GMP驗證服務/3Q驗證/設備確認/廠房驗證的專業(yè)服務商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程/驗證等事業(yè)部的質控外包服務。

我們活躍于許多關鍵市場領域,從細胞/基因治療領域、抗體藥方向、干細胞治療到疫苗生產等生物制藥領域,一直以來都是圍繞生物醫(yī)藥客戶實現讓讓制藥體系更安全"為使命,提高服務的效率、降低行業(yè)的成本、踐行好的客戶服務體驗。自主品牌:華譜(上海)檢測技術有限公司、澤恒計量檢測(北京)有限公司。

 

 

 

 

 

 

 

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